四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型的建立
  • 技术应用
  • 2015-08-06 09:06
  • 来源:中国纺织机械网
  • 作者:[db:作者]
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  •   4,13肝脏生化指标变化肝脏羟脯氨酸量亦随造模时间延长而逐渐升高,造模601时升高,至904时升更显著0.050.01.肝脏丙1醛含量和血清丙氨酸氨基转换酶在造模各阶段均明显升高,至造模901时,血浆白蛋白比例明显下降2,3讨论肝纤维化动物梭型的研究,足开展肝纤维化防治研究的基础工作。用14诱导的大鼠肝纤维化模型,具有耗时短和病变典型的优点,是经典的研宄肝纤维化的模型2.为了进步采用价廉动物制作14肝纤维化模型,本文在昆明种小鼠中,定期观察了,诱导肝纤维的形成过程。实验结果明,这种动物模型具有较明显的肝纤维化阶段性变化4我们先前制作的大鼠肝纤维化模型类似6似1小鼠实验费叫低廉。易厂操作。故木模型更具有简便易行的优点。

      肝纤维化程役的准确判断。是实验研宄中个尚未完全解决的问。本文参照以,的肝纤维化分朴滩对肝纤维化的杓度逊行了半定评价。此外,由于羟脯氨酸是胶原蛋白分子所特有,故勹,测定肝脏羟脯闱酸含量。,显小肝脏蛋胶原蛋白含量,直接反映肝纤维化程度4.本文在3爪,的造模观察过程中,发现肝纤维化程度和羟脯氨酸含量逐渐递增,反映了肝纤维化的分期,说明本模型具有较明显的阶段性变化。

      在着重观察小鼠肝纤维化形成过程中,本文还同时观察了与肝损害有关的其他生化指标变化。发现在肝纤维化形成的各个阶段中,肝脏丙醛含量和血清丙,酸这基转换酶水平均叨显升说明该模型的肝纤维化形成机制与肝细胞损伤有关,但各阶段之间无显著差异,与肝纤维化程度无关。至造模后期,模型组动物的血清白蛋白比例明显下降,可能系肝纤维化进行性发展的后果,亦说明该模型后期可导致肝功能失代偿。

      本模型制备过程中存在的主要问是实验后期动物死率达33.3,肝脏无明显假小叶形成。

      尽管如此,由于该模型有肝纤维化逐渐形成征象,故而适合抗肝纤维化药物的防治研究。

      2马学惠。肝纤维化动物模型的造模方法。中华肝脏病杂志,LifidJLipidRes1981;22376396许建明,梅肖,魏伟富硒酵母对大鼠肝纤维化形成的影响。肝胆外科杂志,1999;75395,6大鼠肝实质及非实质细胞分离和质量检测张燕年贤仁张志善汗昨孔锐湖北医科大学药理学教讲室。武汉43X71中国书分类号仆33332247;329.24;345.6件。方法应用胶原酶蛋白酶消化分离和低速离心技术,以细胞活率。细胞产量和细胞纯度等指标检测细胞质量。结果在370.58.1的胶原作318001.,1离心条件下,肝实质细胞产量98父109士4109.1纯度97±2和活率,90*好,胶原酶和蛋白酶合用。肝非实质细胞产量*高28.6父109士3.7109.,如淖。细胞纯度合理160±3.5且叩和1细胞含量符合体内正常分布。结论本实验方法分离细胞对于进步研宄肝实质,尤其肝非实质细胞功能有实际意义。

      以往,肝实质细胞和非实质细胞分离多采阳灌流法而进步纯化非实质细胞国外应用了淘析修回湖北省教委资助项目9501作者简介张燕取女,31岁,硕士,从事生化药理研宄;彭仁热女,65岁,教授,博士生导师,教研室主任,从事生化药理研究器和2等分离剂由于灌流装置较复杂,淘析器设备昂贵或分离剂来源不易而难以广泛应用。本文在现有实验条件下,用不同条件方法分离肝实质细胞和非实质细胞,以细胞活率细胞产量和细胞纯役冷指标检测细胞质浸。探索分离两类细胞的合理条件。

      1材料和方法1.1动物1哗出抓公大鼠。体逭150200 1.2试剂1型胶原,妒;31基胆蒽为3公司产品。其它为国产分析纯。

      1.3细胞分离火鼠乙醚麻醉。门静脉插管,目201.液冲洗肝脏至灰色,摘取肝脏用。3.1实质细胞分离肝组织用0.5厂,1胶原酶,37水浴消化30,用200目尼龙网过滤,滤液在06条件下分别以200500800和1 500厂,1离心15爪。弃上清,用0;液漂洗,重从3次,末次弈上。细朐以磷酚缓冲液重悬。

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